ထုတ်ကုန်များ

X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside အတွက် BCIG အတိုကောက်) သည် အစားထိုး indole နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသော galactose ပါဝင်သော အော်ဂဲနစ်ဒြပ်ပေါင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။အဆိုပါဒြပ်ပေါင်းကို 1964 ခုနှစ်တွင် Jerome Horwitz နှင့် ပူးပေါင်းဆောင်ရွက်သူများမှ ပေါင်းစပ်ထုတ်လုပ်ထားပါသည်။ တရားဝင်ဓာတုအမည်ကို မကြာခဏ အတိုချုံးဖော်ပြလေ့ရှိသော်လည်း bromochloroindoxyl galactoside ကဲ့သို့သော ခက်ခဲသောစကားစုများလည်း နည်းပါးပါသည်။Indoxyl မှ X သည် X-gal ကျုံ့ခြင်းရှိ X ၏ရင်းမြစ်ဖြစ်နိုင်သည်။X-gal ကို ၎င်း၏ပုံမှန်ပစ်မှတ်ဖြစ်သော β-galactoside နေရာတွင် အင်ဇိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည့် β-galactosidase ပါဝင်မှုကို စမ်းသပ်ရန်အတွက် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒတွင် မကြာခဏအသုံးပြုသည်။histochemistry နှင့် bacteriology တို့တွင် ဤအင်ဇိုင်း၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကို သိရှိရန်လည်း အသုံးပြုပါသည်။X-gal သည် အင်ဒိုးရှင်း glycosides နှင့် esters အများအပြားထဲမှ တစ်ခုဖြစ်ပြီး မဲနယ်ဆိုးဆေးနှင့် ဆင်တူသော မပျော်ဝင်နိုင်သော အပြာရောင်ဒြပ်ပေါင်းများကို အင်ဇိုင်း-ဓာတ်ကူပစ္စည်း ဟိုက်ဒရိုလစ်စီ၏ ရလဒ်အဖြစ် ထုတ်ပေးပါသည်။

X-gal သည် lactose ၏ analog တစ်ခုဖြစ်ပြီး ထို့ကြောင့် D-lactose တွင် β-glycosidic နှောင်ကြိုးကို ခွဲထုတ်သည့် β-galactosidase အင်ဇိုင်းဖြင့် ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေနိုင်သည်။X-gal သည် β-galactosidase ဖြင့် ခွာလိုက်သောအခါတွင်၊ galactose နှင့် 5-bromo- 4-chloro-3-hydroxyindole - 1 ထွက်လာသည်။ ထို့နောက် အလိုလို သေးငယ်လာပြီး 5.5'-dibromo-4,4'-dichloro အဖြစ်သို့ oxidized ဖြစ်သည် -indigo - 2၊ မပျော်ဝင်နိုင်သော ပြင်းထန်သော အပြာရောင် ထုတ်ကုန်။X-gal ကိုယ်တိုင်က အရောင်မရှိသောကြောင့် အပြာရောင် ထုတ်ကုန်များ၏ ပါဝင်မှုကို တက်ကြွသော β-galactosidase ပါဝင်မှုကို စမ်းသပ်မှုအဖြစ် အသုံးပြုနိုင်သည်။၎င်းသည် ဘက်တီးရီးယား β-galactosidase (lacZ ဟုခေါ်သည်) ကို အမျိုးမျိုးသော အပလီကေးရှင်းများတွင် သတင်းထောက်အဖြစ် အသုံးပြုရန်လည်း ခွင့်ပြုပါသည်။

နှစ်ခုစပ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတွင် β-galactosidase သည် တစ်ခုနှင့်တစ်ခု အပြန်အလှန်အကျိုးသက်ရောက်သော ပရိုတိန်းများကို ခွဲခြားသတ်မှတ်ရန် သတင်းထောက်အဖြစ် အသုံးပြုနိုင်သည်။ဤနည်းလမ်းတွင်၊ ဂျီနိုမ်စာကြည့်တိုက်များကို တဆေး သို့မဟုတ် ဘက်တီးရီးယားစနစ်သုံး၍ ပရိုတင်းဓာတ် အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုကို စစ်ဆေးနိုင်ပါသည်။ပရိုတင်းများကြားတွင် အောင်မြင်သော အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုရှိပါက၊ ၎င်းသည် activation domain တစ်ခု၏ ချိတ်ဆက်မှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။မြှင့်တင်သူသည် lacZ ဗီဇနှင့် ချိတ်ဆက်ပါက၊ X-gal ၏ရှေ့မှောက်တွင် အပြာရောင်ရောင်ခြယ်သော ကိုလိုနီများဖြစ်ပေါ်လာစေသည့် β-galactosidase ထုတ်လုပ်မှုသည် ထို့ကြောင့် ပရိုတင်းများကြားတွင် အောင်မြင်သော အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုကို ညွှန်ပြမည်ဖြစ်သည်။ဤနည်းပညာသည် 106 ဝန်းကျင်ထက်နည်းသော စာကြည့်တိုက်များကို စစ်ဆေးခြင်းတွင် ကန့်သတ်ထားနိုင်သည်။ အောင်မြင်သော X-gal ၏ ခွဲထွက်မှုသည် အင်ဒိုး၏ မတည်ငြိမ်မှုကြောင့် သိသိသာသာ အနံ့ဆိုးထွက်စေသည်။

X-gal ကိုယ်တိုင်က အရောင်မရှိသောကြောင့်၊ အပြာရောင် ထုတ်ကုန်၏ ပါဝင်မှုကို active β-galactosidase ရှိနေခြင်းအတွက် စမ်းသပ်မှုအဖြစ် အသုံးပြုနိုင်သည်။

တက်ကြွသောအင်ဇိုင်းတစ်ခု၏ ဤလွယ်ကူသောဖော်ထုတ်မှုသည် βgalactosidase (lacZ gene) အတွက် မျိုးဗီဇကို အပလီကေးရှင်းအမျိုးမျိုးတွင် သတင်းထောက်ဗီဇအဖြစ် အသုံးပြုရန် ခွင့်ပြုသည်။