ထုတ်ကုန်များ

Tris acetate ဆားကို ပြေးနေသောကြားခံနှင့် agarose gels များတွင် အသုံးပြုသည့် TAE (Tris-acetate-EDTA) ကြားခံပြင်ဆင်မှုတွင် မကြာခဏအသုံးပြုသည်။Tris Acetate-EDTA ကြားခံကို DNA agarose gel electrophoresis အတွက် အသုံးပြုသော်လည်း၊ denaturing မဟုတ်သော RNA agarose gel electrophoresis အတွက်လည်း အသုံးပြုပါသည်။Double-stranded DNA သည် TAE တွင် အခြားသော buffers များထက် ပိုမြန်ပြီး တိုးချဲ့ electrophoresis တွင် ကုန်ဆုံးသွားနိုင်သည်။တိုးချဲ့ထားသော electrophoresis ကာလအတွင်း ကြားခံလည်ပတ်မှု သို့မဟုတ် ကြားခံအစားထိုးခြင်းသည် နည်းပါးသော buffering စွမ်းရည်ကို ကုစားနိုင်သည်။အဖြေတွင် DNA ၏ရွေ့လျားမှုကိုလေ့လာရန် အာရုံစူးစိုက်မှုအမျိုးမျိုးတွင် အသုံးပြုနိုင်သည်။TBE ကြားခံတွင် borate (Tris-Borate-EDTA Buffer၊ 10X Powder Pack, sc-296651) သည် အင်ဇိုင်းများစွာအတွက် အားကောင်းသော တားဆေးဖြစ်သောကြောင့် DNA နမူနာအတွက် အင်ဇိုင်းအပလီကေးရှင်းများကို ကြည့်ရှုသည့်အခါ TAE ကြားခံကို အကြံပြုပါသည်။Tris acetate ဆားသည် ပိုးစုန်းကြူး Luciferase ဖြင့် ATP စစ်ဆေးမှုများတွင် အာရုံခံနိုင်စွမ်းမြင့်မားသော ကြားခံတစ်ခုလည်းဖြစ်သည်။

အသုံးပြုမှုများ- TAE လည်ပတ်နေသောကြားခံသည် DNA agarose gel electrophoresis အတွက် အသုံးအများဆုံး ကြားခံဖြစ်ပြီး မူရင်း RNA agarose gel electrophoresis အတွက်လည်း အသုံးပြုပါသည်။နှစ်ထပ်သောင်တင်ထားသော DNA သည် TAE တွင်အခြားကြားခံများထက်ပိုမိုမြန်ဆန်စွာရွေ့လျားနိုင်သော်လည်း တာရှည်လျှပ်စစ်ဖိုရစီစစ်အတွင်း ကြားခံအိုင်းယွန်းများလျော့နည်းသွားခြင်းကြောင့်လည်း ရေကူးရန်ပျက်ကွက်ပါသည်။တာရှည် electrophoresis ကာလအတွင်း ကြားခံစက်ဘီးစီးခြင်း သို့မဟုတ် ကြားခံလဲလှယ်ခြင်းသည် နိမ့်သောကြားခံစွမ်းရည်အတွက် လျော်ကြေးပေးနိုင်သည်။2 40 mM Tris acetate နှင့် 1 mM EDTA၊ pH 8.3 ပါရှိသော 1 mMTAE ကြားခံကိုရရှိရန် စုစည်းထားသော TAE ကြားခံကို အအေးခံပါ။1 mMTAE ကြားခံအား agarose gels နှင့် run နေသောကြားခံအဖြစ်နှစ်မျိုးလုံးအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။အမြင့်ဆုံးကြည်လင်ပြတ်သားမှုအတွက်၊ အသုံးပြုထားသောဗို့အား 5V/cm (ယူနစ်လျှပ်ကူးပစ္စည်းကြားအကွာအဝေး) ထက်နိမ့်နေရန် အကြံပြုထားသည်။

လျှောက်လွှာ- TAE လည်ပတ်နေသည့်ကြားခံသည် ဓာတုဗေဒစာအုပ်ဂျယ်လ်တွင် DNA agarose gel electrophoresis အတွက် အသုံးအများဆုံး ကြားခံဖြစ်ပြီး ၎င်းကို denaturing မဟုတ်သော RNA agarose gel electrophoresis အတွက်လည်း အသုံးပြုပါသည်။နှစ်ထပ်သောင်တင်ထားသော DNA သည် TAE တွင်အခြားကြားခံများထက်ပိုမိုမြန်ဆန်စွာရွေ့လျားနိုင်သော်လည်း တာရှည်လျှပ်စစ်ဖိုရစီစစ်အတွင်း ကြားခံအိုင်းယွန်းများလျော့နည်းသွားခြင်းကြောင့်လည်း ရေကူးရန်ပျက်ကွက်ပါသည်။တာရှည် electrophoresis ကာလအတွင်း ကြားခံစက်ဘီးစီးခြင်း သို့မဟုတ် ကြားခံလဲလှယ်ခြင်းသည် နိမ့်သောကြားခံစွမ်းရည်အတွက် လျော်ကြေးပေးနိုင်သည်။စုစည်းထားသော TAE ကြားခံအား 40 mM Tris acetate နှင့် 1 mM EDTA၊ pH 8.3 ပါရှိသော 1 mMTAE ကြားခံကိုရရှိရန် ရောနှောထားသည်။1 mMTAE ကြားခံအား agarose gels နှင့် run နေသောကြားခံအဖြစ်နှစ်မျိုးလုံးအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။အမြင့်ဆုံးကြည်လင်ပြတ်သားမှုအတွက်၊ အသုံးပြုထားသောဗို့အား 5V/cm (ယူနစ်လျှပ်ကူးပစ္စည်းကြားအကွာအဝေး) ထက်နိမ့်နေရန် အကြံပြုထားသည်။

အသုံးပြုမှုများ- firefly luciferase ဖြင့် ATP ကို ​​ရှာဖွေရာတွင်၊ ဤထုတ်ကုန်သည် အထိခိုက်မခံဆုံး ကြားခံဖြစ်သည်။glutamate binding detection ။

[3H]l-glutamic acid ၏ ရွှေ့ပြောင်းနိုင်သော အာရုံခံမဟုတ်သော ပစ္စည်းများနှင့် ချိတ်ဆွဲခြင်း။

[3H]L-glutamic acid သည် microfuge ပြွန်များနှင့် ဖန်များနှင့် ချိတ်ဆက်မှုကို ကြားခံလေးခုတွင် စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့သည်။ဤပစ္စည်းများနှင့် နောက်ခံဆက်စပ်မှုမှာ အားနည်းသော်လည်း Tris-HCl နှင့် Tris-citrate ကြားခံများတွင် centrifugation သို့မဟုတ် suction ဖြင့် တိုးလာပါသည်။ဤစည်းနှောင်မှုမှာ များစွာနည်းသည် သို့မဟုတ် HEPES-KOH သို့မဟုတ် Tris-acetate ကြားခံကို အသုံးပြုသောအခါတွင် လျော့နည်းသွားသည်။[3H]မိုက်ခရိုဖန်ပြွန်များနှင့် L-glutamate ချိတ်ဆက်ခြင်းကို L- ဒါပေမယ့် glutamate နှင့် aspartate ၏ D-isomers မှ တားဆီးထားပါသည်။DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic အက်ဆစ်သည်လည်း ပေါင်းစပ်မှုကို မတားစီးခဲ့ပါ။အနိမ့်မှ အလယ်အလတ် တားစီးကြောင်းပြသသည့် အခြားဒြပ်ပေါင်းများမှာ- N-methyl-D-aspartate၊ quisqualate၊ L-glutamic acid diethyl ester၊ N-methyl-L-aspartate၊ kainate၊ နှင့် 2-amino-4 -phosphonobutyrate။ချည်နှောင်ခြင်းကို ပုံသေကြွက်ဦးနှောက်အမြှေးပါးများဖြင့် ဟန့်တားထားသည်။Tris-acetate ကြားခံတွင် ချည်နှောင်ခြင်းကို လုပ်ဆောင်သောအခါ ပရိုတင်း-မှီခို [3H] glutamate binding ကို ထပ်ခါတလဲလဲ အေးခဲထားသော အမြှေးပါးပြင်ဆင်မှုဖြင့် ရရှိခဲ့သည်။glutamate binding assay တွင် Tris-acetate သို့မဟုတ် HEPES -KOH ကြားခံကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။Tris-HCl သို့မဟုတ် Tris-citrate ကြားခံကိုအသုံးပြုပါက၊ microfuge tubes သို့မဟုတ် glass fiber filter များနှင့် ချိတ်ဆက်ရန်အတွက် သင့်လျော်သော ထိန်းချုပ်စမ်းသပ်မှုကို လုပ်ဆောင်သင့်သည်။